胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集时间早,其胎球蛋白较多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量极低,并富含多种生长因子,因此,是培养细胞更为优良的牛血清。牛血清的成分复杂,主要包含蛋白质、多肽、元素、氨基酸、葡萄糖等多种营养成分。虽然其中大部分成分已为人知,但还有一部分也还不清楚,而且其组分及含量常依动物性别、年龄、生理状态、营养条件不同而有差异。血清理含有促进细胞生长的成分外,同时含有内有害元素、血色素、补体、抗体等其他有害成分,影响细胞生长甚至导致细胞死亡,因此,通常需要测试工作才知道对细胞生长的效果。低质量的血清常被病毒、菌体和支原体等微生物传染,导致细胞培养失败,浪费了科研人员的时间和精力。胎牛血清可以提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清营养成分完全而丰富,代谢产物极少,微生物传染的可能性更小,品质更高,是组织细胞培养和病毒增殖时的重要营养来源。在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,在实验中使用10%的澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根据具体细胞选择合适的胎牛血清(澳洲)浓度。RPMI 1640培养基(无硝酸钙)胎牛血清极低内有害元素,达到特级标准,使细胞更健康,实验更顺利。
胎牛血清的保存方法:1、需要长期保存的胎牛血清须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。3、胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
胎牛血清的作用有哪些?保护细胞,胎牛血清可以为生日包的生长提供一些重要的元素,同时可以为身体提供蛋白质,能够识别维生素和一些其他的物质,因此能够比较好的来处理一些有害物质。这个产品也可以提供蛋白酶的抑制剂,可以使细胞传代时,将剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能够起到保护细胞不受到伤害的作用。胎牛血清是一个比较先进的产品,也是一个比较先进的研发成果,目前的生产成本是比较高的,所以在市面上的价格并不会太便宜,根据了解目前的销售价格可能需要2000多元,所以大家看到几百元的产品要慎重的购买,当然可能也会与规格的大小有密切的关系。胎牛血里的生长因子适合牛体内各种细胞生长,通常在8个月胎龄后慢慢消失。
胎牛血清、新生牛血清、小牛血清区别三者之间的区别:1、采集血液时间不同,胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺采集血液获取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。2、组份与比例不同,两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、元素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。用途与用法不同,某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。胎牛血清经过细胞培养和杂交瘤细胞培养验证。RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
胎牛血清全程冷链运输,无冻融现象。RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
细胞和组织培养为什么需要使用血清?血清通常作为补充剂,以2-10%的浓度加入培养基中,为细胞提供综合营养、元素、生长和附着因子。血清还可作为细胞培养系统的缓冲液,避免各种因素(包括pH变化、蛋白水解活性或重金属、内毒等)干扰细胞生长或产生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷冻运输至加工工厂,解冻并检测细菌、病毒、内有害元素和血红蛋白含量等多项指标。选择更优良的血清在无菌环境下进行系列膜过滤无菌处理,然后在无菌环境下进行分装并快速冻存于-20°C,在所有批次验证达到或找过QC标准之前隔离存放。RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
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